ПРИМЕНЕНИЕ ВЭЖХ-МС/МС ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ИНСУЛИНОПОДОБНЫХ ФАКТОРОВ МЫШЕЧНОГО РОСТА
Аннотация
Активное развитие протеомики и геномики приводит к все большему пониманию проблемы изучения и разработки терапевтических средств на основе пептидов. В последние годы получил широкое распространение ряд низкомолекулярных пептидов, используемых в качестве факторов мышечного роста и официально включенных в список запрещенных ВАДА препаратов. Отдельно стоит отметить, что большинство из них не проходили клинических испытаний и могут быть потенциально опасными для здоровья употребляющих их людей. Рассмотрены наиболее распространенные способы определения некоторых низкомолекулярных инсулиноподобных факторов мышечного роста с использованием метода ВЭЖХ с масс-спектрометрическим детектированием. Показано, что наибольшая эффективность разделения достигается с использованием метода обращенно-фазовой жидкостной хроматографии, при этом предел обнаружения составляет 5 нг/мл. Предложен способ определения некоторых инсулиноподобных факторов мышечного роста с использованием ВЭЖХ-ЭРИ-МС/МС в режиме “Wrong-way round ionization”, обеспечивающим аналогичную чувствительность. В данном режиме ионизация осуществляется в щелочной среде с регистрацией положительных ионов, несмотря на отсутствие явного источника протонов, путем переноса протона из иона аммония в газовой фазе. Показано существенное изменение параметров удерживания определяемых веществ за счет изменения их формы нахождения в анализируемой пробе. Рассмотрена возможность применения гидрофильной хроматографии для разделения изучаемых низкомолекулярных пептидов. Установлено, что в случае применения HILIC возможно определение количества пептидов.
Ключевые слова: пептиды, ВЭЖХ-МС/МС, допинг, “Wrong-way round ionization”, HILIC.
DOI: http://dx.doi.org/10.15826/analitika.2016.20.2.003Полный текст:
PDF (Russian)Литература
Pozo O.J., Eenoo P.V., Deventer K., Delbeke F.T. [Development and validation of a qualitative screening method for the detection of exogenous anabolic steroids in urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2007, vol. 389, pp. 1209-1224. doi: 10.1007/s00216-007-1530-6.
Thomas A., Schänzer W., Delahaut P., Thevis M. [Sensitive and fast identification of urinary human, synthetic and animal insulin by means of nano‐UPLC coupled with high‐resolution/high‐accuracy mass spectrometry]. Drug Testing and Analysis, 2009, vol. 1, pp. 219-227. doi: 10.1002/dta.35.
Arvat E., Vito L. di, Maccagno B., Broglio F., Boghen M. F., Deghenghi R., Camanni F., Ghigo E. [Effects of GHRP-2 and hexarelin, two synthetic GH-releasing peptides, on GH, prolactin, ACTH and cortisol levels in man. Comparison with the effects of GHRH, TRH and hCRH]. Peptides, 1997, vol. 18, pp. 885-891. doi: 10.1016/S0196-9781(97)00016-8.
Okano M., Nishitani Y., Sato M., Ikekita A., Kageyama S. [Influence of intravenous administration of growth hormone releasing peptide-2 (GHRP-2) on detection of growth hormone doping: Growth hormone isoform profiles in Japanese male subjects]. Drug Testing and Analysis, 2010, vol. 2, pp. 548-556. doi: 10.1002/dta.166.
Ghigo E., Arvat E., Muccioli G., Camanni F. [Growth hormone-releasing peptides]. European Journal of Endocrinology, 1997, vol. 136, pp. 445-460. doi: 10.1530/eje.0.1360445.
Hashizume T., Tanabe Y., Ohtsuki K., Mori A., Matsumoto N., Hara S. [Plasma growth hormone (GH) responses after administration of the peptidergic GH secretagogue KP102 into the oral cavity, rumen, abomasum and duodenum in adult goats]. Domestic animal endocrinology, 2001, vol. 2001, pp. 37-46. doi:10.1016/S0739-7240(00)00087-4.
Thevis M., Schanzer W. E. [Drugs-Potential for misuse in sport and doping control detection strategies]. Mini reviews in medicinal chemistry, 2007, vol. 7, pp. 533-539. doi: 10.2174/138955707780619590.
The World Anti-Doping Code. The 2016 Prohibited List. International Standard for Laboratoties. Available at: https://wada-main-prod.s3.amazonaws.com/resources/files/wada-2016-prohibited-list-en.pdf (Accessed 22.03.2016).
Semenistaya E., Krotov G., Rodchenkov G. [Determination of growth hormone releasing peptides metabolites in human urine after nasal administration of GHRP-1, GHRP-2, GHRP-6, Hexarelin, and Ipamorelin]. Drug Testing and Analysis, 2015, vol. 7, pp. 919-925. doi: 10.1002/dta.1787.
Thomas A., Kohler M., Mester J., Geyer H., Schaenzer W., Petrou M., Thevis M. [Identification of the growth‐hormone‐releasing peptide‐2 (GHRP‐2) in a nutritional supplement]. Drug testing and analysis, 2010, vol. 2, pp. 144-148. doi: 10.1002/dta.120.
Thomas A., Walpurgis K., Krug O., Schänzer W., Thevis M. [Determination of prohibited, small peptides in urine for sports drug testing by means of nano-liquid chromatography/benchtop quadrupole orbitrap tandem-mass spectrometry]. Journal of Chromatography A, 2012, vol. 1259, pp. 251-257. doi:10.1016/j.chroma.2012.07.022.
Thomas A., Höppner S., Geyer H., Schänzer W., Petrou M., Kwiatkowska D., Thevis M. [Determination of growth hormone releasing peptides (GHRP) and their major metabolites in human urine for doping controls by means of liquid chromatography mass spectrometry]. Analytical and Bioanalytical chemistry, 2011, vol. 401, pp. 507-516. doi: 10.1007/s00216-011-4702-3.
Gaudiano M. C., Valvo L., Borioni A. [Identification and quantification of the doping agent GHRP‐2 in seized unlabelled vials by NMR and MS: a case‐report]. Drug testing and analysis, 2014, vol. 6, pp. 295-300. doi: 10.1002/dta.1603.
Zhou S., Cook K.D. [Protonation in Electrospray Mass Spectrometry: Wrong-Way-Round or Right-Way-Round?]. Journal of American Society of Mass Spectrometry, 2000, vol. 11, pp. 961-966. doi: 10.1016/S1044-0305(00)00174-4.
Virus E.D., Sobolevsky T.G., Rodchenkov G.M. [‘Wrong-way-round ionization’ and screening for doping substances in human urine by high performance liquid chromatography/orbitrap mass spectrometry]. Journal of Mass Spectrometry, 2012, vol. 47, pp. 381-391. doi: 10.1002/jms.2055.
Ссылки
- На текущий момент ссылки отсутствуют.