ОПРЕДЕЛЕНИЕ 1-ПИРЕНОЛА В МОЧЕ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С МАСС-СЕЛЕКТИВНЫМ ДЕТЕКТОРОМ
Аннотация
1-пиренол в моче принадлежит к биологическим маркерам экспозиции полиароматических углеводородов. Ряд методик определения 1-пиренола в моче обязательно включает ферментативный гидролиз, извлечение из биопробы, дериватизацию силилирующим агентом. Ферментативный гидролиз и силилирование занимают весьма продолжительное время: 16 часов и 40 минут соответственно. Предлагается менее продолжительный и более чувствительный вариант определения 1-пиренола в моче методом газовой хроматографии с масс-селективным детектированием. Для расщепления коньюгированной формы 1-пиренола (в виде глюкуронида) применяли ферментативный гидролиз β-глюкуронидазой в течение 1 часа. После ферментативного гидролиза аналит извлекали из биологической матрицы экстракцией гексаном с дальнейшим упариванием экстракта до сухого остатка в токе инертного газа. Оптимальные условия жидкостной экстракции устанавливали путём вариации соотношения – высаливающий агент : время экстракции : кратность экстракции. Сухой остаток перерастворяли и дериватизировали в силилирующим реагенте N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамиде (БСТФА) в триметилсилиловый эфир при комнатной температуре в течение 5 мин. Анализ триметилсилильного экстракта осуществляли методом газовой хроматографии на капиллярной колонке HP-5MS с масс-селективным детектированием. Идентификацию аналита проводили по времени удерживания и соотношению основного и подтверждающего ионов. Высокоточное определение обеспечивалось за счёт использования внутреннего стандарта 1-пиренол-d9. Диапазон определяемых концентраций методики от 0.1 до 100 мкг/л. Повторяемость и внтрилабораторная прецизионность составили 4.4 % и 6.4 % соответственно. Систематическая погрешность оказалась незначимой. Точность составила 15 %. Метод апробировали на образцах мочи работников алюминиевого производства разных профессий.
Ключевые слова: 1-пиренол, моча, газовая хромато-масс-спектрометрия, ферментативный гидролиз, силилирование
Полный текст:
PDF (Russian)Литература
REFERENCES
Jongeneelen F.J., Bos R.P., Anzion R.B., Theuws J.L., Henderson P.T. Biological monitoring of polycyclic aromatic hydrocarbons metabolites in urine. Scand. J. Work Environ. Health., 1986, vol.12, pp.137 – 143. doi: 10.5271/sjweh.2166
Boogaard P.J. Urinary biomarkers in the risk assessment of PAHs. Occupational and Enivironmental Medicine, 2008, vol.65, pp. 221 – 222. doi: 10.1136/oem.2007.034157.
Unwin J., Cocker J., Scobbie E., Chambers H. Anassesment of occupational exposure to polycyclic aromatic hydrocarbonsin the UK. Annals of Occupational Hygiene, 2006, vol.50, pp. 395 – 40. doi: 10.1093/annhyg/mel010
Hansen A.M., Mathiesen L., Pedersen M., Knudsen L.E. Urinary 1-hydroxypyrene (1-HP) in environmental and occupational studies – A review International Journal of hygiene and environmental health, 2008, vol.211, pp. 471 – 503. doi: 10.1016/j.ijheh.2007.09.012
Jacob J., Seidel A. Biomonitoring of polycyclic aromatic hydrocarbons in human urine. J. of chromatography B., 2002, vol. 778, pp. 31 – 47.
Rossella F., Campo L., Pavanello S., Kapka L., Siwinska E., Fustinoni S. Urinary polycyclic aromatic hydrocarbons and monohydroxy metabolites as biomarkers of exposure in coke oven workers. Occup Environ Med., 2009, vol.66, pp. 509 – 516. doi: 10.1136/oem.2008.042796
Jongeneelen F.J., Anzion R.B., Henderson P.T. Determination of hydroxylated metabolites of polycyclic aromatic hydrocarbons in urine. J. of Chromatography, 1987, vol.413, pp. 227 – 233. doi: 10.1016/0378-4347(87)80230-x
Campo L., Rossella F., Fustinoni S. Development of a gas chromatography/mass spectrometry method to a quantify several urinary monohydroxy metabolites of polycyclic aromatic hydrocarbons in occupationally exposed subjects. J. of chromatography B, 2008, vol.875, pp. 531 – 540. doi: 10.1016/j.jchromb.2008.10.017
Shin H.S., Lim H.H. Simultaneous determination of 2-naphtol and 1-hydroxypyrene in urine by gas chromatography-mass spectrometry. J. of chromatography B, 2011, vol. 879, pp. 489 – 494. doi: 10.1016/j.jchromb.2011.01.009.
Blau K., Halket J.M. Handbook of derivates for Chromatography. 2nd ed. New-York: Wiley, 1993. 369 p.
Pierce A.E. Silylation of organic compounds: A Technique for Gasphase Analysis, Pierce chemical Co, 1968. 487p.
Schummer C., Delhomme O., Brice M. R., Appenzeller; Wennig R., Millet M. Comparison of MTBSTFA and BSTFA in derivatization reaction of polar compounds prior to GC/MS analysis // Talanta, 2009, vol. 77, pp. 1473 – 1482. doi:10.1016/j.talanta.2008.09.043
RMG 61–2010. Pokazateli tochnosti, pravil'nosti, pretsizionnosti metodik kolichestvennogo khimicheskogo analiza. Metody otsenki [Accuracy, trueness and precision measures of the procedures for quantitative chemical analysis. Methods of evaluation] Ekaterinburg, 2013. 60 p. (in Russian)
DOI: https://doi.org/10.15826/analitika.2019.23.4.007
Ссылки
- На текущий момент ссылки отсутствуют.