ЭЛЛИПСОМЕТРИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ СОРБЦИИ БЕЛКОВ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ PLOT-КОЛОНОК С ДЕНДРИТНОЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗОЙ

V. Potolitsyna, L. Kartsova, E. Bessonova

Аннотация


Методом эллипсометрии изучена возможность сорбции белков (альбумин, инсулин, лизоцим и миоглобин) на поверхности сверхразветвленных полимеров (СРП) – водорастворимых олигосахаридных производных полиэтиленимина (PEI-Mal), используемых в качестве стационарной фазы в капиллярной электрохроматографии (КЭХ). Известно, что многие белковые молекулы являются маркерами различных заболеваний, поэтому для успешной диагностики этих заболеваний необходимо их точное количественное определение, а необратимая адсорбция белков на стенках кварцевого капилляра в процессе разделения может искажать результаты анализа, поэтому знание особенностей процессов адсорбции белков на различных поверхностях весьма актуально.

В работе для исследования возможной адсорбции белков выбран метод эллипсометрии как высокочувствительный, быстродействующий и бесконтактный. Эллипсометрия неоднократно и успешно использовалась различными исследователями для изучения адсорбции различных веществ из газовой и из жидкой фаз. В работе проведены эллипсометрические измерения в режиме in situ на поверхности кремниевой пластины, покрытой тонкой пленкой сверхразветвленного полиэтиленимина, модифицированного мальтозой. Методом эллипсометрии установлено, что СРП препятствует адсорбции белков на стенках капиллярной колонки при их электрофоретическом разделении в условиях капиллярной электрохроматографии.

Ключевые слова: мальтозилированный сверхразветвленный полиэтиленимин, эллипсометрия, адсорбция белков, капиллярная электрохроматография, PLOT-колонки.

DOI: http://dx.doi.org/10.15826/analitika.2014.18.1.009

 


Полный текст:

PDF (Russian)

Литература


Petersen J.R., Mohammad A.A. Clinical and Forensic Applications of Capillary Electrophoresis. New York: Humana Press, 2012, 456 p.

Ahuja S., Jimidar M. Capillary Electrophoresis Methods for Pharmaceutical Analysis (Separation Science and Technology). Waltham: Academic Press, 2008. 546 p.

Scriba G.K.E. Capillary electrophoresis: Pharmaceutical applications. [ Reference Module in Chemistry, Molecular Sciences and Chemical Engineering, from Encyclopedia of Analytical Science. Second Edition], 2005, pp. 343-354.

Belen’kii B.G. Vysokoeffektivnyi kapilliarnyi elektroforez [High efficient capillary electrophoresis]. Moscow, Nauka Publ., 2009, 314 p. (in Russian).

El Rassi Z. CE and CEC. Reviews. New York: Wiley, 2001. 606 p.

Ozkan S.A. Electroanalytical Methods in Pharmaceutical Analysis and Their Validation. New York: HNB Publishing, 2012, 350 p.

Kartsova L., Bessonova E., Polikarpov N. [Synthesis of methacrylate monolithic phase for capillary electrochromatography]. J. Sorbtsionnye i khromatograficheskie protsessy [Sorption and chromatographic processes]. 2008. vol. 8. no. 5. pp. 724-731 (in Russian).

Haynes J.L., Shamsi S.A., Dey J., Warner I.M. Use of a new diaminobutane dendrimer in electrokinetic capillary chromatography. Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 1998, vol. 21, pp. 611-624.

Shou C.Q., Zhou C.L., Zhao C.B., Zhang Z.L., Li G.B., Chen L.R. Preparation and evaluation of non-bonded hyperbranched polymer-coated columns for capillary electrophoresis. Talanta,. 2004, vol. 63, pp. 887-891.

Chen M.L., Chen X.W., Wang J.H. Functionalization of MWNTs with Hyperbranched PEI for Highly Selective Isolation of BSA. Macromolecular Bioscience, vol. 10, pp. 906-915.

Yin C.Q., He B.J., Huang S.H., Zhang J.Y., Bai Z.W., Li Z.Y. Synthesis of dendritic stationary phases with surface-bonded L-phenylalanine derivate as chiral selector and their evaluation in HPLC resolution of racemic compounds. Chirality, 2008, vol. 20, pp. 846-855.

Mathews B.T., Beezer A.E., Snowden M.J., Hardy M.J., Mitchell J.C. Evaluation of novel dendrimer chiral stationary phases using. Chromatographia, 2001, vol. 53, pp. 147-155.

Bessonova E., Polikarpov N., Kartsova L., Potolitsyna V. [Investigation of the potential of new hyperbranched polymers as the pseudo-stationary phases in electrokinetic chromatography in determining protein]. Vestnik SPbU [St. Petersburg State University Gazette], vol. 4, 2011, no. 1, pp. 100-106 (in Russian)

Appelhans D., Komber H., Quadir M.A., Richter S., Schwarz S., van der Vlist J., Aigner A., Muller M., Loos K., Seidel J., Arndt K.F., Haag R., Voit B. Hyperbranched PEI with Various Oligosaccharide Architectures: Synthesis, Characterization, ATP Complexation, and Cellular Uptake Properties. Biomacromolecules, 2009, vol. 10, pp. 1114-1124.

Potolitsyna V., Kartsova L., Bessonova E. [Synthesis and studying of properties of PLOT-columns on the basis of new dendritic polymers for the separation of proteins by capillary electrochromatography]. Zhurnal analiticheskoi khimii [Journal of analytical chemistry], 2013, vol. 68, no. 11, pp. 1096-1100 (in Russian).

Tompkins H., Irene E. Handbook of Ellipsometry. New York: William Andrew Inc., 2005. 870 p.

Woollam J.A. Tutorial Available at: http://www.jawoollam.com/tutorial_1.html (Accessed 15.11.2013).

Woollam J.A. User Manual VASE and M-44 Ellipsometers, WVASE 32 TM Available at: http://www.jawoollam.com/products.html (Accessed 20.11.2013).

De Feijter J.A., Benjamins J., Veer F.A. Ellipsometry as a tool to study the adsorption behavior of synthetic and biopolymers at the air–water interface. Biopolymers, 1978, vol. 17, pp. 1759-1772.

Tosatti S., Paul S.M.D., Askendal A., VandeVondele S., Hubbell J.A., Tengvall P., Textor M. Peptide functionalized poly(l-lysine)-g-poly(ethylene glycol) on titanium: resistance to protein adsorption in full heparinized human blood plasma. Biomaterials, 2003, vol. 24, pp. 4949-4958.


Ссылки

  • На текущий момент ссылки отсутствуют.